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一、試劑保存
配制前均為冷凍保存,有效期18個月(0-5℃冷藏保存為12個月)。
二、試劑配制
緩沖液:取一包用510ml蒸餾水搖勻溶解后常溫備用。
底 物:取一瓶加入10ml蒸餾水搖勻溶解,用時取100μl,配制后0-5℃冷藏保存。
酶 液:取一瓶加入10ml緩沖液搖勻溶解,用時取100μl,配制后0-5℃冷藏保存。
顯色劑:取一瓶加入10ml緩沖液搖勻溶解, 用時取100μl,配制后0-5℃冷藏保存。
三、檢測樣本制備
1、取有代表性的蔬菜除去泥土,用天平稱取2g,葉菜取葉片部分,瓜果取皮4g。
2、將菜樣剪成1cm見方大小置于小燒杯內(nèi),加入10ml緩沖液,震蕩1-2分鐘。
3、將燒杯中的浸泡液用移液管吸取上清部分2.5ml移入另一試管內(nèi),即為樣本提取液。
四、測試
取一支試管加入2.5ml緩沖作為空白對照,然后與各樣本提取液的試管分別依次加入酶 液 100ul, 顯色劑 100ul 搖勻,放置10分鐘 底物100ul
搖勻后馬上倒入比色皿中然后立即放入儀器,按“開始空白分析”鍵后等待檢測結(jié)果。(做過對照后,接下來的檢測則按“開始樣品分析”,但重新開機或更換試劑后需要再做一次空白對照)
注:檢測時間為3分鐘的空白對照值△AO應≥0.3;當溫度低于20℃時應該采取加溫措施,以提高數(shù)據(jù)的準確性;若△AO<0.3,又無條件加溫時,空白及樣品的酶量可加倍。
五、結(jié)果判定
抑制率<50%時判定為合格;抑制率≥50%時農(nóng)藥殘毒超標,必要時可進行定量檢測。
六、注意事項
1、試劑使用時,用一瓶配制一瓶,用前應搖勻;
2、試劑應避免交叉污染,吸出后的試劑不可再打回瓶內(nèi);
七、包裝規(guī)格:
500份,(酶、底物,顯色劑)各1瓶,提取試劑2包。
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